液相色譜法與酶法測定糖化血紅蛋白

液相色譜法與酶法測定糖化血紅蛋白均有較好的精密度，但兩種方法之間存在一定的差異，應(yīng)以液相色譜法作為參考方法，對酶法的結(jié)果進行校準。 酶是一種專一性強、催化效率高的生物催化劑。利用酶的這些特點來進行分析的酶法分析，與其他分析方法相比有許多*的優(yōu)點。當待測樣品中含有結(jié)構(gòu)和性質(zhì)與待測物十分相似(如同分異構(gòu)體)的共存物時，要找到被測物*的特征性質(zhì)或者要將被測物分離純化出來，往往非常困難。 酶分析法是一種生物藥物分析方法。酶分析法在生物藥物分析中的應(yīng)用主要有兩個方面：*，以酶為分析對象，根據(jù)需要對生物藥物生產(chǎn)過程中所使用的酶和生物藥物樣品所含的酶進行酶的含量或酶活力的測定，稱為酶分析法；第二，利用酶的特點，以酶作為分析工具或分析試劑，用于測定生物藥物樣品中用一般化學(xué)方法難于儉測的物質(zhì)，如底物、輔酶、抑制劑和激動劑(活化劑)或輔助因子含量的方法稱為酶法分析。 如果有僅作用于被測物質(zhì)的酶，利用酶的特異性，不需要分離就能辨別試樣中的被測組分，從而對被測物質(zhì)進行定性和定量分析。所以，酶法分析常用于復(fù)雜組分中結(jié)構(gòu)和物理化學(xué)性質(zhì)比較相近的同類物質(zhì)的分離簽定和分析，而且樣品一般不需要進行很復(fù)雜的預(yù)處理。酶法分析具有特異性強，干擾少，操作簡便，樣品和試劑用量少，測定快速，靈敏度高等特點。 由于酶反應(yīng)一般在溫和的條件下進行，不需使用強酸強堿，它還是一種無污染或污染很少的分析方法。很多需紅使用氣相色譜儀、高壓液相色譜儀等貴重的大型精密分析儀器才能完成的分析檢驗工作，應(yīng)用酶法分析方法即可簡便快速地進行。 液相色譜是色譜法的一個重要分支，以液體為流動相，采用高壓輸液系統(tǒng)，將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入裝有固定相的色譜柱，在柱內(nèi)各成分被分離后，進入檢測器進行檢測，從而實現(xiàn)對試樣的分析。該方法已成為化學(xué)、醫(yī)學(xué)、工業(yè)、農(nóng)學(xué)、商檢和法檢等學(xué)科領(lǐng)域中重要的分離分析技術(shù)。 液相色譜法有“四高一廣”的特點：高壓、高速、、高靈敏度、應(yīng)用范圍廣。此外液相色譜還有色譜柱可反復(fù)使用、樣品不被破壞、易回收等優(yōu)點，但也有缺點，與氣相色譜相比各有所長，相互補充。 液相色譜的缺點是有“柱外效應(yīng)”。在從進樣到檢測器之間，除了柱子以外的任何死空間（進樣器、柱接頭、連接管和檢測池等）中，如果流動相的流型有變化，被分離物質(zhì)的任何擴散和滯留都會顯著地導(dǎo)致色譜峰的加寬，柱效率降低。